雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶基因克隆、分析及叶绿体表达载体构建

β-胡萝卜素酮化酶(BKT)是雨生红球藻虾青素合成途径中的关键酶。根据GenBank中所收录的雨生红球藻BKT的cDNA序列设计特异性引物,以高光照处理的雨生红球藻细胞的总RNA为模板,采用RT-PCR的方法克隆出了β-胡萝卜素酮化酶基因(bkt)。

序列测定结果表明,bkt全长960bp编码320个氨基酸。克隆的bkt序列与GenBank收录的BKT的cDNA(AY603347)序列只相差一个碱基。并对其编码的氨基酸进行了二级结构的预测和疏水性分析。同时将所克隆的bkt构建入衣藻叶绿体表达载体p64Dbkt,为基因的进一步表达研究及探索其作用机制奠定了基础。

【作者单位】：中国科学院海洋研究所中国科学院海洋研究所青岛科技大学化工学院中国科学院海洋研究所

【关键词】：雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶基因(bkt)基因克隆序列分析载体构建

【基金】：国家自然科学基金项目(编号30470156)中国科学院创新项目(编号KZCX3-SW-215)