采用0.5%TritonX 100破碎细胞,15%Percoll分离盐藻细胞核,25mM二碘水杨酸锂(lithiumdi iodosalicylate,LIS)抽提核蛋白,限制酶消化除去结合松弛的DNA,蛋白酶K SDS处理,酚/氯仿抽提,乙醇 沉淀提取核基质附着DNA,限制酶酶切连至pUC18载体上构建MARs文库。随机挑选6个克隆进行体外结 合实验筛选,筛选出一能与核基质结合的克隆,测序分析结果表明该序列具明显的MAR序列特征。
【作者单位】: 郑州大学细胞生物学研究室
【关键词】: 盐藻 核基质附着区 核基质 基因沉默
【基金】:国家自然科学基金(30270031) 国家高科技计划“863”资助(2002AA628050)项目
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原文链接:http://www.yanzao360.com/2386.html
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