胡萝卜素和盐藻提取物刺激小鼠免疫功能

提要

用β-胡萝卜素和盐藻提取物给小鼠腹腔注射，剂量为10mg/kg/d，10天后断颈处死小鼠观察其脾细胞和腹胶巨噬细胞功能。实验结果表明,卜胡萝卜素和盐藻提取物组的脾细胞增殖活性,和巨噬细胞膜表面cb3受体活性明显高于对照组P(<0.01)。实验结果提示, β-胡萝卜素和盐藻提取物经腹腔途径可刺激小鼠免疫功能。

关键词  β-胡萝卜素   盐藻提取物  脾细胞增殖  巨噬细胞Cb3受体

体内外的功物实验表明，β-胡萝卜素参与肿瘤的预防过程，但详细机理尚不完全清楚。β-胡萝卜素是VitA的天然无毒性前体,关于VitA在体内外对肿瘤的分化、诱导等报道很多〔2·3」.但能起作用的VitA剂量远远大于人体生理摄入量，易引起急性和亚急性中毒，因而对β-胡萝卜素的研究引起人们极大兴趣。本实验通过腹腔注射卜胡萝卜素和盐藻提取物(从盐藻中提取.含卜胡萝卜素83.84%)来观察它们对小鼠脾细胞增殖活性和腹腔巨噬细胞Cb3受体活性的影响。

材料与方法

动物：C57BL6/纯系小鼠.18士g2,雌性,由河南医科大学实验动物中心提供。

试剂：β-胡萝卜素(E,MerckDarmaatdr);盐藻提取物(轻工业部制盐研究所);ConA(广州医药工业研究所);RpMll640培养液(Gi比。)，并补充25mMHepes,NaHCO3,青霉素100U/ML，链霉素100ug/ml及新生牛血清(10%v/v);酵母多糖(本研究室自制)。

方法

小鼠分为3组,一组为溶剂对照组,另两组为卜胡萝卜素组和盐藻提取物组(1Oomgk/g)。均给小鼠腹腔注射,每天1次,连续0t天后断颈处死小鼠做下述指标:

1.脾细胞增殖试验:详细方法参见文献5。简述如下:无菌取出小鼠脾脏，使之成为单个细胞。用Trsi一NH;cl溶解红细胞后,洗涤3次，调整细胞浓度为5xl06细胞/ml,加入Con A(7.5阳/ml),培养72小时后用MTT比色分析法测OD值。

2.腹腔受体活性观察：详见文献6。简述如下，取腹腔巨噬细胞与补体致敏的酵母按1:20混合后置4小时，然后固定染色镜检，计数200个细胞，结合酵母3个以上者为受体阳性细胞。

统计学处理

均采用t检验。

结果

对脾细胞增殖的影响

实验结果如表1，腹腔注射β-胡萝卜素和盐藻提取物组的脾细胞增殖反应明显高于对照组（P<0.01）。

对腹腔巨噬细胞C3B受体的影响

从表2可见，两个实验组受体阳性率明显高于对照组（P<0.01）

 讨论

流行病学调查表明,食用富含β-胡萝卜素的食物与某些肿瘤的发生缝明显负相关，这提示β-卜胡萝卜素参与了肿瘤的预防过程。β-胡萝卜素预防肿瘤的假说之一就是通过激活免疫系统而发挥作用。免疫系流主要有三类细胞参与抗肿瘤免疫：巨噬细饱，自然杀伤细胞(NK)和细胞毒性T淋巴细胞。我们曾给小鼠口服卜胡萝卜素及盐藻提取物30周。发现小鼠的脾细胞增破活性和腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因广的活性明显高于饮水对照组(待发表资料)。在本实验中，通过腹腔注射的途径给予β-胡萝卜素，也可以明显地激活脾细胞对CnoA的增殖活性和巨噬细胞膜表面C3b受体的活性。脾细胞对cnoA反应性增加主要体现了T淋巴细胞的活化,而C3b受体活性的增加表明了巨噬细胞活化,活化的巨噬细胞是参与抗肿瘤免疫的前提。

盐藻提取物内主要成分为β-胡萝卜素(占83.84%),其次为a-胡萝卜素和三十余种复合物,本实验表明它与卜胡萝卜素有一致的作用。而且在诱导脾细胞增殖方面，作用略高于β-胡萝卜素,这可能与盐藻提取物内所含其它成分有关。

β-胡萝卜素是VitA的前体物质,它在体内可代谢为VitA而起作用，但也有文献报道卜胡萝卜素本身具有抗氧化、体外激活细胞等功能。从肿瘤预防的角度讲.卜胡萝卜素大量摄入不会象VitA那样会在体内积聚中毒,因而更加受到人们的重视。

小盐藻 大健康 

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