大豆胰蛋白酶抑制剂基因KSTI3在盐藻中的稳定表达

应用PCR技术扩增Nos基因、CaMV35S启动子片段和氯霉素抗性基因Cat,并与胰蛋白酶抑制剂基因KSTI3连接,构建真核表达载体pMDCKN-Cat。DNA序列分析结果表明:表达载体中的胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因、启动子CaMV35S、终止子Nos和氯霉素抗性基因Cat与己知序列完全一致。

采用LiAc/PEG介导法将质粒pMDCKN-Cat转化至盐藻细胞中,通过氯霉素抗性基因筛选和PCR鉴定获得转基因盐藻细胞。经Westernblotting检测,在硝酸纤维素膜上出现清晰的条带,分子量为20.1KD,证明胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因在盐藻中得到成功表达。

【作者单位】：大连海洋大学海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室

【关键词】：胰蛋白酶抑制剂KsTl基因 盐藻 LiAc/PEG介导法 真核表达载体