超声波介导编码嵌合体SBR-CT~(ΔA1)基因转化盐藻细胞转化条件的研究

目的:确立超声波介导编码嵌合体SBR-CTΔA1基因转化盐藻细胞的转化条件。方法:分别用超声波处理超声处理液、质粒DNA、野生盐藻,观察3者的变化和(或)生长情况;采用超声波法将目的基因转化入盐藻细胞,观察不同转化条件对盐藻转化的影响;PCR法鉴定转基因盐藻。

结果:用超声波处理超声处理液,当处理时间达到10min,输出功率达到88W时,超声处理液温度过高,超过盐藻最适生长温度;用超声波处理盐藻,当功率过强、时间过长时,盐藻生长受到影响,藻落数减少;在处理时间不超过5min,输出功率不超过66W条件下,质粒DNA经超声波处理后无明显变化;使用高功率、短时间,或低功率、长时间可以实现外源基因对盐藻的转化,22W×5min、33W×2min、44W×2min、44W×3min、55W×2min、66W×1min是较合适的转化条件;获得在含草丁膦的培养基中生长良好的转基因盐藻,提取总DNA进行PCR扩增分析,表明目的基因整合入盐藻基因组中。结论:确立超声波介导编码嵌合体SBR-CTΔA1基冈转化盐藻细胞的转化条件,为转基因盐藻防龋疫苗的研究提供工作基础。

【作者单位】：中山大学光华口腔医学院 中山大学光华口腔医学院

【关键词】：龋病 盐藻 疫苗 超声波