研究进展

盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶同工酶基因的克隆、功能及产生机制研究

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盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶同工酶基因的克隆、功能及产生机制研究
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盐生杜氏藻(Dunaliella salina,简称盐藻)是一种迄今为止发现的世界上最耐盐的真核光合生物,可以在0.3%到饱和盐浓度的范围内生长。盐藻是单细胞绿藻,没有细胞壁,生长快,是一种很好的研究盐胁迫和渗透胁迫的模式物种。

盐藻是通过在细胞内快速而大量的合成甘油来调节细胞内外的渗透平衡的。本实验室首次从盐藻中克隆到了甘油合成途径上的关键酶基因——3-磷酸甘油脱氢酶的两个同工酶基因GPDH1和GPDH2。为了搞清楚GPDH1和GPDH2在盐藻细胞里的具体分工,揭示两种同工酶特殊的基因结构与其高效甘油转化效率之间的关系,以及这两个新基因产生的分子机制与盐藻进化之间的关系。

盐藻

本论文研究了GPDH1和GPDH2两种同工酶基因在胁迫条件下的表达与甘油合成动态变化之间的关系,并对3-磷酸甘油脱氢酶同工酶基因进行生物信息分析、大肠杆菌表达、以及重组蛋白的酶活特性研究和基因组结构比较分析。

取得的结果如下: 克隆获得了盐藻3-磷酸甘油脱氢酶基因GPDH1,通过对盐藻的GPDH1和GPDH2进行序列分析,发现这两条同工酶都具有两个结构域,即丝氨酸磷酸化酶(SerB)结构域和3-磷酸甘油脱氢酶(GPD)结构域,相对于其它已经报道的植物3-磷酸甘油脱氢酶多出来一个SerB结构域。

【关键词】:新基因 盐生杜氏藻 3-磷酸甘油脱氢酶 3-磷酸甘油磷酸化酶 盐胁迫 甘油

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