杜氏盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段的克隆与分析

目的:获得杜氏盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段。方法:根据Dunaliellatertiolecta、衣藻、团藻等生物硝酸盐还原酶(nitratereductase,NR)高度保守序列EGWWFKP、WNVMGMM设计一对简并引物,以含硝酸盐培养基培养的的盐藻cDNA为模板,进行PCR扩增,产物克隆至T载体后转化大肠杆菌JM109,经筛选后测序,将测序结果推导成氨基酸序列,并与Dunaliellatertiolecta、团藻、衣藻、小球藻等进行同源性分析。结果:在盐藻中所获得的cDNA片段,核苷酸长度为381bp,编码127个氨基酸。

推导的氨基酸序列与下列物种的硝酸盐还原酶进行同源性比较:Dunaliellatertiolecta为88.2%同源,团藻为78%,衣藻为67%,小球藻为59%。结论:所克隆的序列为盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段。

【关键词】： 杜氏盐藻 硝酸盐还原酶 cDNA 简并引物