选用CarboPac PA20分析柱(3mmi.d.×150mm),以.H2O-250 mmol/L NaOH-1 mol/L NaAc为流动相建立了三元梯度洗脱分离、积分脉冲安培检测多糖中常见的8种中性单糖和 2种糖醛酸的高效阴离子交换色谱分析方法;利用离子交换色谱柱(DEAE Sepharose CL6B fast,flow,3.5cm×30cm)和凝胶过滤色谱柱(Sepharose CL6B,2.6cm×100cm)从提取出β-胡萝卜素的杜氏盐藻残渣中分离出PD1、PD2、PD3、PD4a和PD4b共5个多糖级分,选用适当的条件水解后,利用高效阴离子交换色谱法测定了各多糖级分的单糖组成。
其中具有显著生物活性的多糖级分PD4a中主要含有半乳糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、盐藻糖及鼠李糖六种中性糖,还含有少量糖醛酸;PD4b中主要含有核糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及木糖五种中性糖,不含糖醛酸。
该结果与PMP柱前衍生化反相高效液相色谱法测定的单糖摩尔比基本一致。10种单糖的离子色谱法的检出限为0.76-2.92nmol/L(以3倍信噪比计),峰面积相对标淮偏差RSD为0.72-3.25%。
【作者单位】:江南大学分析测试中心 中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室 中国药科大学生命科学学院 江南大学分析测试中心 江南大学分析测试中心 中国药科大学生命科学学院 上海农业科学院食用菌研宄所
【关键词】:高效阴离子交换色谱法 杜氏盐藻 多糖 单糖
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