聚球藻、盐藻荧光特性研究

聚球藻、盐藻荧光特性研究

摘要　[目的]研究聚球藻和盐藻的荧光特性,确定其在特征激发、发射波长下藻浓度和荧光强度的关系,寻找一种确定藻类浓度的简便方法。[方法]以岛津ＲＦ5301型荧光分光光度计分析检测聚球藻和盐藻的激发和发射光谱,并获得它们的荧光强度与以血球计数板计数的藻浓度之间的关系。[结果]聚球藻和盐藻的激发、发射光谱有着明显的不同。在它们特征的激发、发射波长下,其浓度与荧光强度呈良好的线性关系。[结论]通过测定藻类的荧光强度就可推算出特定藻类的浓度,且该方法比血球计数板计算藻类的浓度更为便捷。

关键词　聚球藻;盐藻;荧光强度;激发光谱;发射光谱

中图分类号　Ｑ949.2　　文献标识码　Ａ　　文章编号　0517-6611(2010)17-08838-02

作者简介　蔡尽忠(1979-),男,福建厦门人,助理实验师,从事环境微

生物方面的研究。

收稿日期　2010-03-22

藻类是由多种色素组成的海洋生物,这些色素组成了藻类的光合色素系统,其中叶绿素ａ是负责光合作用的主要色素,叶绿素ｂ、叶绿素ｃ、类胡萝卜素和藻胆色素等都作为辅助色素,在接受光照的能量后,高效率地将光能传递给叶绿素ａ,荧光来自于不能被光合作用系统利用和吸收的光能[1]。研究发现2个特性:一是同一种藻类受到不同波长单位强度激发光激发时,发出的荧光强度不同;二是不同藻类的荧光光谱征随细胞色素组成(叶绿素、藻胆色素、类胡萝卜素)和光能在其中传输过程的不同而异[2]。聚球藻和盐藻分别属于蓝藻门和绿藻门的藻类,它们所含的特征色素不同:蓝藻含有叶绿素ａ、叶绿素ｂ和类胡萝卜素;绿藻含叶绿素ａ、藻胆蛋白[3]。海藻中含有的特征色素叶绿素ａ、叶绿素ｂ、类胡萝卜素和藻胆蛋白的特征激发波长分别为440、470、530和560ｎｍ[3-6]。

笔者通过改变激发、发射光的波长,用荧光分光光度计分析聚球藻、盐藻的发射、激发光谱图。在特征激发、发射波长下,获得它们的荧光强度与以血球计数板计数的藻浓度之间的关系。结果表明,聚球藻和盐藻的激发、发射光谱有着明显的不同。在它们特征的激发、发射波长下,其浓度与荧光强度呈良好的线性关系。建立了通过测定藻类的荧光强度推算出特定藻类浓度的方法。

1　材料与方法

1.1　材料　聚球藻、盐藻均来自集美大学水产学院。仪器:岛津ＲＦ5301型荧光分光光度计。

1.2　荧光分光光度计工作参数设置　激发、发射单色器狭缝宽度为5ｎｍ,1ｃｍ的标准四通石英比色皿,扫描步长为1ｎｍ。

1.3　激发波长的选择　分别以聚球藻和盐藻含有的特征色素的特征激发波长作为其发射光谱,发射光谱扫描范围600～750ｎｍ。

1.4　发射波长的选择　以出现最高荧光发射峰处的波长作为发射波长作激发光谱,激发光谱的扫描范围为300～550ｎｍ。

1.5　确定浓度与其荧光强度关系的试验方法　用血球计数板分别计算2种藻浓度[7]。不同浓度的藻类,测其最佳激发、发射波长下的荧光强度。

2　结果与分析

2.1　聚球藻

2.1.1　荧光特性。聚球藻的发射、激发光谱分别如图1、2所示。聚球藻在波长650ｎｍ处有荧光发射峰,与叶绿素ｂ的荧光发射峰一致[3]。聚球藻在340～380ｎｍ处有荧光激发峰,在365ｎｍ处荧光强度就大。与其特征色素的最佳激发光的波长均不一致,可能是藻类中含有的色素共同作用的结果,导致其最佳激发波长发生了红移。