杜氏盐藻电击转化方法的系统优化

【摘要】：本研究系统分析了盐藻生长状态、电击条件、电击缓冲液成分和质粒浓度等条件对电击转化效率的影响。实验结果表明:正常接种后培养7d对数生长中期的盐藻细胞,在25μF、0.8kV的电击条件下加入终浓度为10μg/mL的质粒可使盐藻电击转化效率达到1.85‰;电击缓冲液中加入0.4mol/L的甘油可使转化效率显著提高至2.03‰(P0.05)。

在上述优化电击体系下,运用3种不同质粒分别转化盐藻细胞后获得的转化效率无显著差异。通过对电击转化中相关因素的优化,本研究建立了一种适用于杜氏盐藻的高效稳定的电击转化体系,为杜氏盐藻的转基因研究提供有效方法。

【作者单位】：郑州大学生物工程系细胞生物学研究室;

【关键词】：杜氏盐藻电击转化效率

【基金】：科技部国际科技合作项目(No.2007DFA01240)国家自然科学基金项目(Nos.30700014,30600006)资助

【分类号】：Q943.2