正本文探讨了电激转化盐生杜氏藻的条件,实现了质粒pBI211-cat的瞬时表达;并在此基础之上构建RNAi表达载体pBIRNAI-Dsa,实现pds基因的表达抑制。采用了两种电激模式-高电压低电容模式下3-7kV/cm和低电压高电容模式下300-500V/cm转化质粒pBI221-cat:PCR扩增检测cat基因部分序列及组织化学染色法GUS检测也同时证明质粒pBI221-cat在盐生杜氏藻中瞬时表达。
在此基础之上,插入pds基因的正反向重复序列,构建RNAi表达载体pBIRNAI-Dsa,电激方法转入杜氏盐藻细胞,荧光定量PCR结果表明,转入干涉载体pBIRNAI-Dsa的实验组的pds基因表达显著下降,最低达对照组的28%,表达受到抑制。
【作者单位】:中国海洋大学海洋生命学院中国海洋大学海洋生命学院中国海洋大学海洋生命学院
【分类号】:Q943.2
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