利用盐生杜氏藻提取件胡萝卜素

利用盐生杜氏藻提取件胡萝卜素

盐生杜氏藻(Du,:aliellaSali,:a)为隶属绿藻门(ClllorPo勺ta)、绿藻纲(Cllelrposllcea`)、团藻目(Vovlocaze:)、盐藻科(Dunaziezzaceae)的海藻〔,,,因原生质裸露,体形变化很大。它繁殖快,生活力强,易于培养,营养丰富,蛋白质含量达50%左右〔”,脂肪9%左右,糖类巧%左右〔4,,维生素C4%左右,且Ca、P、Zn含量亦高,其中,在最佳条件下,俘胡萝卜素含量可达干重的12%左右。本文介绍了以盐藻为原料,用氧化镁柱层析法来生产件胡萝卜素的工乙。

具体操作方法

(l)皂化

4%NaOH甲醇液的配制:NaOH固体先用少量蒸馏水溶解,后加甲醇稀释。

盐生杜氏藻粉置于棕色茄型烧瓶中,加入一定量的抗坏血酸钠及4%NaOH甲醇溶液,装上冷凝管,在60一70℃下加热hl,并时时振摇。

(2)冷却革取分离

加热后,立即在反应液中加入一定量的甲醇混匀冷却,液体移入棕色分液漏斗中。烧瓶用少量甲醇洗涤3次,洗液并入原分液漏斗中,混匀后在室温放置。后加少量水,混匀,加入1倍量的石油醚与乙醚的混合溶剂(1:1混合,含抗氧化剂BHT5o一loomg/L。石油醚经重蒸馏,取40~60℃馏分,下同),振摇约lmni,静置分

层。分层后,分取水层于另一棕色分液漏斗中,再用半倍量石油醚与乙醚的混合溶剂(同前)同样提取水层1次.

(3)水洗

合并两次醚层,多次用1倍量蒸馏水洗涤,弃去水层,直至水层不呈碱性,得件胡萝卜素提取液。

(4)真空浓缩

所得提取液转入棕色茄型烧瓶中,装上冷凝管,在50~60℃下,减压浓缩为原体积的30%一40%,回收石油醚与乙醚.

(5)柱层析

上述浓缩液加入氧化镁层析柱中,用石油醚与丙酮(7,3,V/V,含BHT5o一loomg/L)的混合洗脱液,以适宜流速洗脱,直到洗脱液无色。弃去开始的无色洗脱液,收集有色洗脱液,再减压浓缩(50~60℃)到膏状物,真空干燥(6。℃),得卜胡萝卜素粗品。

(6)精制

粗品用石油醚、乙醚混合溶剂(同前)溶解,用另一支氧化镁柱进行层析(同上),洗脱,真空浓缩,真空干燥,即得件胡萝卜素精品。