盐藻β-胡萝卜素亚微乳的制备及活性研究

目的从盐藻中提取β-胡萝卜素(β-C)；建立顺、反式β-C异构体的含量测定方法；制备盐藻β-C亚微乳，研究其抗~(60)Co辐射的作用。方法采用密闭萃取工艺提取盐藻β-C；采用HPLC法测定盐藻全反式β-C、9-顺式-β-C的含量；采用正交试验法确定了盐藻β-C亚微乳的最佳处方和制备工艺；建立了~(60)Co辐射(强度为3Gy)对小鼠胸腺淋巴细胞损伤病理模型(体外)，分为6组：对照组、~(60)Co模型组、~(60)Co+0.64μg·mL~(-1)盐藻β-C组、~(60)Co+0.32μg·mL~(-1)盐藻β-C组、~(60)Co+0.16μg·mL~(-1)盐藻β-C组、~(60)Co+0.1mg·mL~(-1)VitE组；用透射电镜观察小鼠胸腺淋巴细胞超微结构变化；MTT法及Brdu法测定小鼠胸腺淋巴细胞的活性和增殖；琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡；westernblot测定P38蛋白的表达。

结果:盐藻提取物中总B-C含量达226.77mg·g~(-1)，其中9-顺式β-C含量为84.60mg·g~(-1)；亚微乳的乳滴形态圆整，粒径分布均匀，为单峰分布，体积重量径为230±20nm，Zeta电位为-59.29±6.10mv；对光、热稳定；盐藻β-C能抑制~(60)Co辐射所致的胸腺淋巴细胞凋亡，显著提高细胞活性，使处于增殖状态的细胞显著增多，抑制~(60)Co辐射后小鼠胸腺淋巴细胞P38蛋白的磷酸化，经统计学处理，有显著性差异(P＜0.05)。

结论:提取工艺和含量测定方法具有科学性和先进性；盐藻β-C亚微乳处方、工艺合理，性质稳定；盐藻β-C具有抗~(60)Co辐射的作用，且在0.16～0.64μg／mL剂量范围内呈量效关系。

【关键词】：盐藻β-胡萝卜素 亚微乳 9-顺式-β-胡萝卜素 细胞调亡