盐藻启动子活性片段的克隆及序列分析

启动子是基因表达的一个重要元件。要建立某种生物的转化系统或相应的表达载体，首先要有相应的基因启动子用于标记基因的表达或表达单元的建立。

克隆启动子的方法很多，一种常用的方法为:利用启动子缺失的报告基因构建启动子探针质粒来克隆有启动功能的ＤＮＡ片段。本实验报道了以启动子探测质粒pECE7为载体克隆盐藻(Dunaliellasalina)中具有启动子活性DNA片段的研究。

盐藻的研究经限制性内切酶EcoRⅠ分别消化盐藻基因组DNA和质粒pECE7，并进行体外重组及转化筛选，得到一具有启动子活性的DNA片段Ped。经进一步氯霉素抗性筛选，证明此启动子具有较高的活性。测序结果显示Ped长243bp。

对其序列分析表明它具有启动子初级结构的基本特征。Southern杂交显示此启动子片段确实来自于盐藻基因组，且其广泛存在于整个基因组中启动盐藻基因的表达。

经推测，Ped中含有多种转录因子结合位点的同源序列，因此Ped可能参与了多基因表达的调控。